轉(zhuǎn)基因大豆DAS-68416-4(2級)ERM-BF432c檢測技術(shù)

轉(zhuǎn)基因大豆DAS-68416-4 ERM-BF432c標(biāo)準(zhǔn)品是四種DAS-68416-4地面大豆種子粉認(rèn)證參考材料(CRMs)之一，含有不同質(zhì)量分?jǐn)?shù)的轉(zhuǎn)基因大豆。ERM-BF432c由DAS純合子DAS-68416-4大豆和未改良大豆的全種子生產(chǎn)，均由陶氏農(nóng)業(yè)科學(xué)公司(DAS，Oxon，UK)提供。根據(jù)委員會法規(guī)(EC)第65/2004號，轉(zhuǎn)基因的DAS-68416-4大豆具有1的標(biāo)識碼DAS-68416-4。轉(zhuǎn)基因大豆DAS-68416-4 ERM-BF432c可在氬氣氣氛中含有至少1克的干大豆種子粉的玻璃瓶中封閉。

轉(zhuǎn)基因檢測技術(shù)包括蛋白檢測技術(shù)、核酸檢測 技術(shù)、酶活性檢測方法、實(shí)時(shí)熒光聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng) （polymerase chain reaction，PCR）技術(shù)、數(shù)字PCR技術(shù) 等。轉(zhuǎn)基因品系蛋白質(zhì)檢測技術(shù)包括試紙法、酶聯(lián)免疫 吸附測定法、蛋白質(zhì)印跡法、蛋白質(zhì)單向電泳、蛋白質(zhì) 雙向電泳、Western雜交分析等。轉(zhuǎn)基因品系核酸檢測技 術(shù)包括PCR（多重PCR、定性PCR、定量PCR、電化學(xué) 發(fā)光PCR）、連接酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)、指紋圖譜法（限制性片 段長度多態(tài)性、擴(kuò)增片段長度多態(tài)性及隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性 DNA）等技術(shù)。

成熟的實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)通過對 PCR擴(kuò)增反應(yīng)中每一個(gè)循環(huán)產(chǎn)物熒光信號的實(shí)時(shí)檢測， 可以定量及定性分析起始模板。添加一種熒光化學(xué)物質(zhì) 在本技術(shù)中，這樣在反應(yīng)中PCR產(chǎn)物不斷增加，與此相 對應(yīng)的熒光信號的量也不斷被檢測到增長。儀器可以檢 測到每過一個(gè)循環(huán)熒光信號的變化量，最后得到一條熒 光擴(kuò)增曲線圖。實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)有著特異性強(qiáng)、 可重復(fù)性好、定量分析較準(zhǔn)確、PCR污染少、自動(dòng)化程 度高等傳統(tǒng)PCR技術(shù)不具有的特點(diǎn)[7]。轉(zhuǎn)基因檢測技術(shù)可 以分為轉(zhuǎn)基因篩選檢測和轉(zhuǎn)基因品系檢測兩個(gè)層次。轉(zhuǎn) 基因篩選檢測是在一批樣品中篩選區(qū)分出轉(zhuǎn)基因品系和 非轉(zhuǎn)基因品系，轉(zhuǎn)基因品系檢測是根據(jù)相關(guān)檢測標(biāo)準(zhǔn)確 定出具體的轉(zhuǎn)基因品系。

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